流式细胞仪(分选用)
1. 样本制备的浓度和体积有什么要求?
分选样本浓度建议在1~5X107/ml。稀有样本的最小体积不得小于 200ul。待分选的细胞用无血清培养基悬浮。
2. 分选有荧光的细胞,需要准备什么样本?
首次做荧光分选,要准备未染色的样本、同型对照、每一种荧光的单染对照,待分选的细胞。
3. 除了准备细胞,还要准备什么?
准备接收细胞的培养基;接收细胞的容器,包括1.5ml tube、5ml试管、各种规格培养皿、多孔培养板及96孔板。在接收容器中加入培养基和/或血清,以防止细胞破碎。
4. 制备分选样本时需要注意什么?
无菌操作。所有的实验用品、试剂以及仪器本身等,都应做无菌处理。
5. 需要准备多少细胞量?
真正参与分选活动的活细胞大约只占初始细胞总量的一半。根据目标细胞在样本中占的比例,计算出必要的细胞总数,要准备出比计算的细胞总数多出2~3倍的量,才能保证得到回收的细胞数量。
6. 分选后的细胞如何处理?
分选后的细胞不经过任何处理直接培养,细胞贴壁后换液。如果要离心,建议使用离心力1500g。
流式细胞仪(分析用)
1. 如何获得独立操作资格?
使用流式细胞仪分析样本的用户,经过管理员培训,能够独立操作仪器,并且态度认真、具有责任心的用户,经管理员认定可获得仪器的独立操作资格,签署“独立用户声明”后将可预约和使用非工作时间段的机时。
2. 非工作时间如何使用中心仪器?
具备独立操作资格的用户可以在非工作时间使用中心的仪器,不具备独立操作资格的用户不得在非工作时间使用中心的仪器。
3. 如何拷贝数据?
用户不得使用U盘等移动存储器从中心所有仪器附带的计算机上直接拷贝数据,可使用CD刻录数据,将数据传输到专门用来处理数据的计算机上,再使用U盘等移动存储器拷贝数据。
4. 如何保护数据?
重要的数据请立即拷贝。流式用户很多,防备有人误操作,丢失数据。
5. 没有鞘液怎么办?
用干净的容器从Millipore纯水仪直接接水,加入鞘液筒即可。
6. 使用过的样本和样本管如何处理?
PI染料染色的样本和试管测试完成后直接扔到垃圾桶中。其他染色的试管要回收,放到盛有水的水槽中,以备后续处理。