一．  开机程序

1.   把稳压器电源开关设到ON。

2.   打开储液箱，把黑色开关开到TANK CHANGE位置，鞘液桶加满鞘液，倒空废液桶，把黑色开关开到Pressurize位置。

3.   将FACSCalibur右侧下面的绿色按钮按开。

4.   打开电脑。

二．仪器条件设定

1.   点击“苹果”菜单项下的CELLQuest，建立一个新视窗。

2.   点击“Acquire”菜单下的“Parameter description”建立自己的文件夹，保留在屏幕上。

3.   点击“Acquire”菜单下的“Connect to Cytometer”联机，这时出现“Acquisiton Control”对话框，保留在屏幕上。

4.   点击“Cytometer”菜单下的“Detectors/Amps”、“Threshold”、“Compensation”三个对话框，保留在屏幕上。

5.   点击“Cytometer”菜单下的 “Instrument settings”，出现对话框，点击对话框中“open”，选择自己的实验条件后，点击“set”，然后点击“Done”

6.   加上对照样本，样品支撑架置于中位，用LO 流速RUN，点击Acqusiotion Control 对话框的Acquire，观察样品的散射光和荧光参数是否合适，调节 “Detectors/Amps”对话框的相关参数，直到各个参数都合适为止。

7.   点击”Acqusiotion Control”对话框的“Setup”，开始测试样品。

当所有样品分析完毕，即换上双蒸水，

并将流式细胞仪置于“STANDBY”状态，以保护激光管。

三．关机程序

1.   测试完毕样品后，从File中选择Quit, 退出软件，点击“Special”菜单项下的“Shutdown”关机。

2.   试管中加入3 ml Clean液，将样品支撑架置于旁位清洗外管，以外管吸入1ml Clean液，将样品支撑架置于中位，用HI流速RUN5分钟清洗内管，。

3.   试管中加入3 ml双蒸水，同步骤2处理清洗外管和内管。

4.   按“STANDBY”状态等待 3~5分钟（以延长激光管寿命），依次关掉计算机、流式细胞仪、稳压电源。

5.   填写仪器设备使用记录。

四、实验数据拷贝

实验数据必须用CD光盘拷贝。将CD光盘放进光驱，点击苹果，在下拉菜单选择“toast”（最后一项），在弹出的对话框里点击“add”，选择需要拷贝的数据，点击“Record” ，选择“Write session”，等待进度条结束，退出CD盘。

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BD FACSCalibur流式细胞仪简明操作规程